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GST-琼脂糖凝胶FF

货号:
BTR209Q
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提示:本公司全部产品均为科研实验、试剂盒配制专用试剂,非药品、非食品、非体外诊断试剂,不可用于动物及人体!


GST-琼脂糖凝胶FF

(GST- Berpharose FF)

1.产品介绍

GST-琼脂糖凝胶FF是一种将谷胱甘肽(Glutatione)键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质。该产品保留了琼脂糖良好的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,具有载量高、非特异性吸附少、流速快等特点,主要用于谷胱甘肽转移酶标记蛋白(GST融合蛋白)、谷胱甘肽转移酶和谷胱甘肽依赖蛋白的分离纯化。

 

2.规格

1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml、50ml、100ml、500ml、1L

 

3.产品性能

性能

指标

基质

4%琼脂糖微球

配基

谷胱甘肽(Glutatione)

配基密度

100μmol/ml

载量

>10mg谷胱甘肽-S-转移酶/ml

粒径

45-165μm

流速

50-300 cm/h

耐压

0.3MPa

工作温度

4~40℃

pH稳定范围

3~12

化学稳定性

在常用水相缓冲液、1 M乙酸(pH4.0)、6 M

盐酸胍和70%乙醇中稳定

储存缓冲液

20%乙醇

储存温度

4~8℃

 

5.使用方法

①推荐缓冲液:

平衡缓冲液:10 mM PBS

(140 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 1.8 mM KH2PO4, pH 7.3)

洗脱缓冲液:50 mM Tris-HCl、10 mM还原型谷胱甘肽(GSH)、pH 8.0

②平衡:用平衡缓冲液以操作流速平衡层析柱,观察检测器的变化,直到电导率、pH值等参数不变。

③上样:切换转换阀进行上样,上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可进行线性实验找到较佳上样量。样品的预处理:置换缓冲液,澄清过滤(0.45μm、0.22μm)等。

④冲洗:用2-3个柱体积的平衡缓冲液冲洗上样后的层析柱,观察检测器的变化,直到电导率、pH等参数不变。此时未交换的组分将被清洗出去。

⑤洗脱:一般推荐用10 mM还原型谷胱甘肽溶液(可含缓冲成分)进行洗脱。

⑥再生:用蒸馏水按操作流速冲洗3-5个柱体积,接着用平衡液洗到平衡3-5个柱体积。再生时若有失活的蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗(CIP)法除去。

⑦在位清洗(CIP):去除沉淀和变性蛋白:用2个柱体积的6 M盐酸胍清洗,立即用10 mM PBS(pH7.4)洗5个柱体积。去除强疏水蛋白:用3~4个柱体积的70%乙醇清洗,立即用10 mM PBS(pH7.4)洗5个柱体积。

 

6.注意事项:

1)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。

2)本产品保存条件为20%乙醇,4-8℃。

3) 2-25℃,常压,避光运输。

4)仅供科研实验使用。


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